Фрагмент документа "МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ХОЛЕРЫ".
5.1. Отбор и доставка материала на исследование
Материалом для бактериологического анализа могут служить
испражнения, рвотные массы, желчь, трупный материал (отрезки тонкого
кишечника и желчный пузырь); предметы, загрязненные испражнениями
(постельное и нательное белье и др.); вода, ил, гидробионты, сточные
воды, содержимое выгребных туалетов; смывы с объектов окружающей
среды, пищевые продукты, мухи и др.
Материал от больного забирает медицинский персонал лечебного
учреждения немедленно после выявления больного и до начала лечения
антибиотиками. Руководитель несет ответственность за правильность
отбора, хранения и доставки проб в лабораторию.
Необходимо учитывать высокую чувствительность холерных вибрионов
к дезинфицирующим средствам и кислотам, возможность антагонистического
действия сопутствующей микрофлоры и предполагаемую концентрацию
возбудителя в исследуемом материале. Если в материале от больных
6 9
алгидной формой холеры концентрация возбудителя достигает 10 - 10
м.к./мл, то в испражнениях больных легкой формой и леченных
антибиотиками, реконвалесцентов и носителей количество холерных
2 4
вибрионов обычно не превышает 10 - 10 м.к./г.
Для отбора проб используют чистую стерильную посуду, не
содержащую следов дезинфицирующих растворов. Стерилизацию посуды и
других средств забора материала проводят автоклавированием, сухим
жаром или кипячением в 2-процентном растворе пищевой соды.
Материал для исследования должен быть доставлен не позже чем
через 2 ч после его взятия. В случае удлинения сроков доставки
используют транспортные среды. Наиболее удобной и достаточно
эффективной является 1-процентная пептонная вода (рН 8,4 +/- 0,1).
В пептонную воду в качестве ингибитора сопутствующей флоры может
быть добавлен теллурит калия из расчета 1:100000 - 1:200000 или моющее
средство "Прогресс" в концентрации 0,1 - 0,2%. В отдельных случаях для
транспортирования материала могут быть использованы солевые
консерванты (см. раздел 7).
На флаконах (пробирках) с пептонной водой, передаваемых в
стационары для отбора проб, должна быть этикетка или надпись с
указанием названия среды и даты ее приготовления.
Среды во флаконах или пробирках, закрытых ватно-марлевыми
пробками, рекомендуется хранить не более 2 суток при температуре не
выше (10,0 +/- 0,2) ёC при условии сохранения их стерильности.
Целесообразно обеспечение стационаров и групп забора проб средами в
закатанных флаконах.
При наличии у больного диареи материал забирают до начала
этиотропной терапии в количестве 10 - 20 мл, у больных легкими формами
- 1 - 2 г испражнений. От больных тяжелой формой материал направляют в
лабораторию нативным и в 1-процентной пептонной воде. В транспортную
среду вносят 1 - 2 мл или 1 - 2 г материала на 5 - 6 мл среды.
При вынужденном удлинении сроков доставки материала в лабораторию
(длительное плавание, круиз и т.п.) можно использовать полоски
фильтровальной (промокательной) бумаги. Жидкими испражнениями
пропитывают полоску обычной плотной промокательной бумаги или другого
гигроскопичного материала и герметично упаковывают в пластиковый пакет
для предохранения от высыхания при транспортировании в лабораторию. На
таких полосках холерные вибрионы выживают до четырех-пяти или более
недель, пока сохраняется влага.
При обследовании на вибриононосительство материал забирает
медицинский персонал лечебно-профилактических учреждений, в очаге -
создают специальные группы по отбору проб, работающие под руководством
эпидемиологов.
Материал в количестве 1 - 2 г может быть доставлен на
исследование нативным, в 1-процентной пептонной воде или другой
транспортной среде.
5.1.1. Способы отбора проб от больных холерой, вибриононосителей
и контактных с ними лиц, секционного материала.
Испражнения и рвотные массы в количестве 10 - 20 мл собирают в
стерильную посуду стерильными ложками или стеклянными трубками с
резиновой грушей из индивидуального судна, на дно которого помещают
меньший по размеру сосуд (лоток), удобный для обеззараживания
кипячением.
Для взятия материала у больных с обильным водянистым стулом можно
использовать резиновый катетер, один конец которого вводят в прямую
кишку, а другой опускают в банку. Жидкие испражнения стекают в сосуд
свободно или при легком массаже брюшной стенки.
Стерильный ректальный ватный тампон из гигроскопической ваты
вводят в прямую кишку на глубину 5 - 6 см и собирают им содержимое со
стенок кишечника. Тампон опускают во флакон или пробирку с
1-процентной пептонной водой, обломив часть деревянного стержня.
Стандартную стерильную петлю из алюминиевой проволоки перед
забором материала смачивают стерильным 0,9-процентным раствором натрия
хлорида и вводят в прямую кишку на 8 - 10 см. Взятый материал
переносят во флакон или пробирку с 1-процентной пептонной водой.
Желчь берут при дуоденальном зондировании в лечебном учреждении.
В отдельные пробирки собирают две порции: из желчного пузыря и желчных
протоков (В и С). Материал доставляют нативным.
От умерших с подозрением на холеру берут отрезки (длиной около 10
см) верхней, средней и нижней частей тонкой кишки, разрез производят
между двойными лигатурами, предварительно наложенными на оба конца
изымаемого участка кишечника. Желчный пузырь после перевязки протока
извлекают целиком. Содержимое кишечника и желчь от трупа можно взять
стерильным шприцем с толстой иглой в объеме до 10 мл и перенести в
емкость с 1-процентной пептонной водой. Взятые образцы органов трупа
укладывают раздельно в стерильные банки.
Банки, пробирки с материалом закрывают непромокаемыми пробками и
пергаментной бумагой, тщательно обрабатывают снаружи салфеткой,
смоченной дезинфицирующим раствором, избегая затекания его внутрь. Все
пробы этикетируют, укладывают в специально подготовленную для
транспортирования металлическую тару и перевозят на служебном
транспорте с сопровождающим. Форма направления дана в Приложении 1.
5.1.2. Отбор проб из объектов окружающей среды.
Воду (питьевую, из поверхностных водоемов и др.) для исследования
берут в количестве 1 л на одну пробу в двух объемах по 500 мл в
стерильную посуду с непромокаемой пробкой.
Из водопроводных кранов пробы воды берут после предварительного
обжигания их спиртовым факелом и спуска воды в течение 10 мин. при
полном открытии крана.
Хозяйственно-бытовые сточные воды отбирают для исследования двумя
способами: в объеме 1 л также в двух емкостях по 500 мл или тампонами,
приготовленными из марлевых салфеток размером 10 x 10 см, сложенных в
10 - 15 слоев. Последние закрепляют у места забора воды, через сутки
помещают в стерильную банку и доставляют в лабораторию.
Гидробионтов (рыб, лягушек и др.) отлавливают из водоемов любым
способом и в закрытых банках, ведрах и других сосудах доставляют в
лабораторию.
Исследовать зоопланктон (дафнии, циклопы и др.) можно групповым
методом, объединяя в один посев 10 - 30 образцов, отловленных на одном
участке водоема. В этом случае они могут быть доставлены в одном
сосуде. При исследовании рыб берут содержимое желудка и жабры.
Смывы с различных объектов окружающей среды берут ватным или
марлевым тампоном, смоченным 0,9-процентным раствором натрия хлорида,
с поверхности площадью 10 x 10 см. Тампон опускают во флакон или
пробирку с 1-процентной пептонной водой.
Для сбора мух расставляют мухоловки, в которые наливают
1-процентную пептонную воду с 1% сахара.
Остатки пищи в очаге и по показаниям пищевые продукты отбирают по
200 г плотных и 0,5 л жидких, помещают в стеклянную посуду и
закрывают. При необходимости в жидкие продукты добавляют основной
пептон до 1-процентной концентрации.
Пробы объектов окружающей среды этикетируют, заполняют
направление (Приложение 2) и отправляют в лабораторию с нарочным
согласно действующим СП.
Перечень предметов, входящих в укладки для отбора проб, см. в
Приложениях 3, 4.
|
Фрагмент документа "МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ХОЛЕРЫ".