Фрагмент документа "МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ХОЛЕРЫ".
8.1. Определение агглютининов в сыворотке крови
Обнаружение противохолерных антител методом развернутой реакции
агглютинации.
Исследуемую сыворотку разводят 1-процентной пептонной водой рН
7,5 +/- 0,1 в объеме 1 мл от 1:10 до 1:640. В качестве антигена
используют 3-часовую бульонную культуру, выделенную в данном очаге,
или исследуют в 3 рядах с культурами холерных вибрионов (сероваров
Огава, Инаба и O139 серогруппы). В пробирку с раститрованной
сывороткой вносят по 1 капле культуры-антигена и ставят на 1 ч в
термостат, затем до утра в холодильник при температуре (4,0 +/- 0,5)
ёC, после чего отмечают результаты. Реакция сопровождается контролями
антигена и сыворотки.
При определении титра реакции учитывают разведения с
агглютинацией на 3 - 4 креста.
Результат исследования сыворотки больного при реакции
агглютинации в разведении 1:40 и выше считается ориентировочно
положительным.
Диагностическое значение имеет не менее чем 4-кратное нарастание
титров антител.
Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) с диагностикумом
эритроцитарным холерным антигенным.
РНГА предназначена для выявления полных антител в сыворотке
крови. Это достаточно специфичная и чувствительная двухкомпонентная
реакция. По чувствительности значительно превосходит реакцию
агглютинации. Необходимые ингредиенты, методика постановки в макро- и
микрообъемах изложены в наставлении к диагностикуму эритроцитарному
холерному антигенному.
Результат исследования сыворотки больного в разведении 1:40 и
выше считается ориентировочно положительным.
Диагностическое значение имеет не менее чем 4-кратное нарастание
титров антител.
Реакция нейтрализации антигена (РНАг).
РНАг служит для выявления антител в сыворотке крови с
использованием диагностикума эритроцитарного холерного
иммуноглобулинового. РНАг - высокоспецифическая трехкомпонентная
реакция. Ее принцип заключается в специфической нейтрализации
добавляемого антигена полными и неполными антителами, содержащимися в
сыворотке. Необходимые ингредиенты, методика постановки в макро- и
микрообъемах изложены в инструкциях по применению к диагностикуму
эритроцитарному холерному иммуноглобулиновому.
При использовании системы реакций РНГА и РНАг отпадает
необходимость в постановке контроля специфичности с каждой исследуемой
сывороткой, т.к. эти две реакции взаимно контролируют полученные
результаты.
Результат исследования сыворотки больного в РНАг в разведении
1:50 (1:80) и выше считается ориентировочно положительным.
Диагностическое значение имеет не менее чем 4-кратное нарастание
титров антител при исследовании парных сывороток в РНГА и РНАг.
|
Фрагмент документа "МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ХОЛЕРЫ".