Фрагмент документа "ПРОДОВОЛЬСТВЕННОЕ СЫРЬЕ И ПИЩЕВЫЕ ПРОДУКТЫ. ПОРЯДОК И ОРГАНИЗАЦИЯ КОНТРОЛЯ ЗА ПИЩЕВОЙ ПРОДУКЦИЕЙ, ПОЛУЧЕННОЙ ИЗ/ИЛИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ГЕНЕТИЧЕСКИ МОДИФИЦИРОВАННЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ И МИКРООРГАНИЗМОВ, ИМЕЮЩИХ ГЕНЕТИЧЕСКИ МОДИФИЦИРОВАННЫЕ АНАЛОГИ. МЕТОДИЧЕ".
9. Алгоритм проведения лабораторных исследований
образцов пищевой продукции
При проведении лабораторных исследований предпринимаются 3
варианта действий, исходя из информации о принадлежности
использованных микроорганизмов к МГМА или к ГММ.
9.1. Алгоритм лабораторного исследования образцов пищевой
продукции, содержащей живые МГМА, предусматривает следующее:
9.1.1. Исследованиям подлежат образцы пищевых продуктов и сырья I
и II групп (п. 4.15 и Прилож. 1 данного документа), полученных с
использованием или содержащих живые МГМА; порядок действий при
проведении исследований отражен в табл. 1.
Таблица 1
-------------------------------------------------------------------------------------
| Испытуемые | Содержание | Результат | Решение |
| образцы | исследований | исследований | |
|---------------|----------------------|--------------------------|-----------------|
| Продукты | 1. Определение | 1. Количество | Положительное |
| I и II | количества | микроорганизмов в | заключение |
| групп | жизнеспособных МГМА | продукте соответствует | по |
| (Прилож. | технологической | нормируемому или | результатам |
| 1) | микрофлоры в 1 г | заявляемому | исследований |
| | продукта | изготовителем уровню | |
|---------------|----------------------|--------------------------|-----------------|
| | 2. Подтверждение | 2. Подтверждена родовая | |
| | родовой и/или | или видовая | |
| | видовой | принадлежность | |
| | принадлежности | микроорганизма согласно | |
| | микроорганизма | представленной | |
| | | заявителем документации | |
|---------------|----------------------|--------------------------|-----------------|
| | 3. Выявление в | 3. Отсутствует ДНК | |
| | образце пищевого | маркерных генов, | |
| | продукта ДНК | плазмидная ДНК | |
| | маркерных векторных | | |
| | генов (например, | | |
| | генов антибиотико - | | |
| | резистентности) | | |
|---------------|----------------------|--------------------------|-----------------|
| | 4. Анализ | 4. Не выявлено | |
| | дополнительных | любых | |
| | показателей качества | признаков, | |
| | и безопасности | неблагоприятных для | |
| | пищевого продукта | потребителей | |
| | согласно (п. п. 4.8б | | |
| | и 4.9) | | |
|---------------|----------------------|--------------------------|-----------------|
| Продукты | 1. Определение | 1. Количество | Отрицательное |
| I и II | количества | микроорганизмов в | заключение |
| групп | жизнеспособных МГМА | продукте | по |
| (Прилож. | технологической | не соответствует | результатам |
| 1) | микрофлоры в 1 г | нормируемому или | исследований |
| | продукта | заявляемому | |
| | | изготовителем | |
| | | уровню | |
|---------------|----------------------|--------------------------|-----------------|
| | 2. Подтверждение | 2. Не подтверждена | |
| | родовой и/или | родовая или видовая | |
| | видовой | принадлежность | |
| | принадлежности | микроорганизма | |
| | микроорганизма | | |
|---------------|----------------------|--------------------------|-----------------|
| | 3. Выявление в | 3. Обнаружена ДНК | |
| | образце пищевого | маркерных генов | |
| | продукта ДНК | | |
| | маркерных векторных | | |
| | генов (например, | | |
| | генов антибиотико - | | |
| | резистентности) | | |
|---------------|----------------------|--------------------------|-----------------|
| | 4. Анализ | 4. Обнаружены | |
| | дополнительных | факторы (маркеры) | |
| | показателей качества | патогенности, | |
| | и безопасности | плазмидная ДНК или | |
| | пищевого продукта | несоответствие | |
| | согласно (п. п. 4.8б | регламентам СанПиН | |
| | и 4.9) | 2.3.2.1078-01 | |
-------------------------------------------------------------------------------------
9.2. Алгоритм лабораторного исследования образцов пищевой
продукции, содержащей живые ГММ.
9.2.1. Исследованиям подлежат образцы пищевых продуктов и сырья I
и II групп (п. 4.15 и Прилож. 1 данного документа), полученных с
использованием или содержащих живые ГММ.
9.2.2. Определение количества жизнеспособных ГММ технологической
микрофлоры в 1 г продукта, если выявленные количества не ниже
нормируемого или заявляемого изготовителем в НТД уровня, то перейти к
п. 9.2.3.
9.2.3. Выявление и идентификация живых ГММ в исследуемом образце
микробиологическими методами. Если выявлены ГММ, не соответствующие
декларации изготовителя, перейти к п. 9.2.13, если выявлены ГММ,
соответствующие указанным в технической документации на продукт и
паспорту, прилагаемому к справке о депонировании <*>, перейти к п.
9.2.4.
------------------------------------
<*> В случае необходимости параллельно с испытуемым штаммом ГММ
из образца продукции исследуется референс-штамм из депозитария
(коллекции культур).
9.2.4. Необходимо убедиться, что микроорганизм-донор целевого
гена и микроорганизм-реципиент этого гена являются хорошо изученными,
разрешенными и давно используемыми в пищевой промышленности: в таком
случае - перейти к п. 9.2.5, если не являются - перейти к п. 9.2.13.
9.2.5. Подтверждение родовой и видовой принадлежности
микроорганизма с помощью ПЦР-анализа генома ГММ: при положительном
результате перейти к п. 9.2.6, при отрицательном - к п. 9.2.13.
9.2.6. Выявление маркерных генов (векторных последовательностей,
селективных маркеров, последовательностей "ori", ауксотрофных
последовательностей (см. МУК 4.2.1830-04)). В случае выявления только
заявленных маркерных последовательностей перейти к п. 9.2.7, в случае
выявления незаявленных маркерных последовательностей - перейти к п.
9.2.13.
9.2.7. Выявление генов антибиотикорезистентности, кодирующих
устойчивость к антибиотикам, имеющим важное клиническое значение в
медицине и ветеринарии: если указанные гены выявлены, то перейти к п.
9.2.13, если не выявлены - перейти к п. 9.2.8.
9.2.8. Выявление целевого гена методом ПЦР с последующим
подтверждением нуклеотидного состава ампликона с помощью
рестрикционного или гибридизационного анализа: если целевой ген
выявлен, то перейти к п. 9.2.12, если не выявлен - перейти к п.
9.2.13.
9.2.9. Определение нуклеотидной последовательности целевого гена
методом секвенирования и сравнение с заявленной последовательностью
нуклеотидов: если результат положительный, перейти к п. 9.2.12, если
отрицательный, перейти к п. 9.2.13.
9.2.10. Подтверждение идентичности продуктов экспрессии целевого
гена заявленным на уровне иРНК (методом ОТ - ПЦР) или методами
электрофореза в ПААГ и иммуноблотинга: если результат положительный,
перейти к п. 9.2.12, если отрицательный, перейти к п. 9.2.13.
9.2.11. Анализ дополнительных показателей качества и безопасности
пищевого продукта (в соответствии с п. п. 4.8б и 4.9) на соответствие
СанПиН 2.3.2.1078-01 "Гигиенические требования безопасности и пищевой
ценности пищевых продуктов": если продукт соответствует требованиям
СанПиН 2.3.2.1078-01 "Гигиенические требования безопасности и пищевой
ценности пищевых продуктов", перейти к п. 9.2.12, если не
соответствует - к п. 9.2.13.
9.2.12. Выдается положительное заключение, согласно которому
образец продукта оценивается как соответствующий СанПиН 2.3.2.1078-01
"Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых
продуктов" в части требований к маркировке и информации.
9.2.13. Выдается отрицательное заключение, согласно которому
образец продукта не соответствует регламентам СанПиН 2.3.2.1078-01
"Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых
продуктов", дальнейшие исследования прекращаются.
9.3. Алгоритм лабораторного исследования образцов пищевой
продукции, не содержащих жизнеспособных ГММ и МГМА.
9.3.1. Исследованиям подлежат образцы пищевых продуктов и сырья
II и III групп (п. 4.15 и Прилож. 1), содержащих нежизнеспособные ГММ
(МГМА) или освобожденных от технологической микрофлоры.
9.3.2. Вначале проводится выявление роста жизнеспособных
микроорганизмов технологической микрофлоры и штаммов-продуцентов в
исследуемом образце и их идентификация микробиологическими методами,
если выявлены живые микроорганизмы-продуценты <*>, соответствующие
указанным в технической документации на продукт или представители
близкородственных им микроорганизмов, которые не могут относиться к
посторонней остаточной микрофлоре, перейти к п. 9.3.11, если не
выявлены - перейти к п. 9.3.3.
------------------------------------
<*> За исключением случаев, когда проводятся дополнительные
исследования по идентификации для подтверждения родовой и видовой
принадлежности референтного штамма из депозитария (коллекции культур).
9.3.3. Далее следует убедиться путем анализа сопроводительной
документации, получен ли штамм-продуцент с использованием
генно-инженерных технологий: если штамм относится к ГММ, перейти к п.
9.3.4, если нет, дальнейшие действия аналогичны указанным в табл. 1.
9.3.4. Следует убедиться, являются ли микроорганизм-донор
целевого гена (например, гена, кодирующего синтез фермента) и
микроорганизм-реципиент (штамм-продуцент) хорошо изученными и имеющими
длительную историю безопасного использования в пищевой промышленности:
если ГММ имеет такие характеристики - перейти к п. 9.3.5, если штаммы
новые - перейти к п. 9.3.11.
9.3.5. Провести тестирование наличия ДНК штамма-продуцента <*>
(родовых и/или видовых последовательностей, генов маркеров и целевого
гена) в анализируемом образце пищевого продукта: если искомые
ДНК-мишени обнаружены - перейти к п. 9.3.6, если не обнаружены -
перейти к п. 9.3.11.
------------------------------------
<*> При необходимости параллельно с тестированием ДНК
штамма-продуцента из образца продукции исследуется ДНК референс-штамма
из депозитария (коллекции культур).
9.3.6. Конкретизировать маркерные гены, кодирующие устойчивость к
антибиотикам, имеющим важное клиническое значение в медицине и
ветеринарии: если обнаружены - перейти к п. 9.3.11, если нет - перейти
к п. 9.3.7.
9.3.7. Определение нуклеотидной последовательности целевого гена
и сравнение с заявленной последовательностью нуклеотидов: если не
обнаружены искомые ДНК-мишени - перейти к п. 9.3.8, если обнаружены -
перейти к п. 9.3.10.
9.3.8. Выявление идентичности белка, экспрессируемого целевым
геном ГММ, заявленному белку (чаще всего - ферменту) с помощью
электрофореза в ПААГ и иммуноблота: если выявлено соответствие -
перейти к п. 9.3.10, если не выявлено - перейти к п. 9.3.11.
9.3.9. Анализ дополнительных показателей качества и безопасности
пищевого продукта проводится в случае необходимости (п. 4.8б) согласно
СанПиН 2.3.2.1078-01 "Гигиенические требования безопасности и пищевой
ценности пищевых продуктов".
9.3.10. Принимается решение, согласно которому образец продукта
оценивается как соответствующий СанПиН 2.3.2.1078-01 "Гигиенические
требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов" в части
требований к маркировке и информации.
9.3.11. Принимается решение, согласно которому образец продукта
оценивается как не соответствующий СанПиН 2.3.2.1078-01 "Гигиенические
требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов",
дальнейшие исследования прекращены.
|
Фрагмент документа "ПРОДОВОЛЬСТВЕННОЕ СЫРЬЕ И ПИЩЕВЫЕ ПРОДУКТЫ. ПОРЯДОК И ОРГАНИЗАЦИЯ КОНТРОЛЯ ЗА ПИЩЕВОЙ ПРОДУКЦИЕЙ, ПОЛУЧЕННОЙ ИЗ/ИЛИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ГЕНЕТИЧЕСКИ МОДИФИЦИРОВАННЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ И МИКРООРГАНИЗМОВ, ИМЕЮЩИХ ГЕНЕТИЧЕСКИ МОДИФИЦИРОВАННЫЕ АНАЛОГИ. МЕТОДИЧЕ".